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Use este identificador para citar ou linkar para este item: https://repositorio.ufpb.br/jspui/handle/tede/9698
Tipo: Dissertação
Título: Avaliação do estresse oxidativo no órgão subfornical e no bulbo ventrolateral rostral de animais Knockout para apolipoproteína E
Autor(es): Assis, Taísa França de Medeiros
Primeiro Orientador: Braga, Valdir de Andrade
Primeiro Coorientador: Balarini, Camille de Moura
Resumo: A aterosclerose é uma doença multifatorial, considerada como um dos principais fatores de risco que levam ao desenvolvimento de outras doenças cardiovasculares. É caracterizada por disfunção endotelial e autonômica devido à presença de inflamação e estresse oxidativo sistêmico. O objetivo deste trabalho foi avaliar a presença de EROs (espécies reativas de oxigênio) no órgão subfornical (SFO) e no bulbo ventrolateral rostral (RVLM) de animais knockout para apolipoproteína E (apoE-/-), alimentados com dieta padrão e a possível relação da presença de citocinas inflamatórias periféricas com a geração de estresse oxidativo central. Para isso foi realizada a coleta do soro de camundongos C57BL/6, camundongos isogênicos, e apoE-/-, camundongos, também isogênicos, geneticamente modificados para a deleção do gene que codifica a apolipoproteína E. O soro foi utilizado para a dosagem do colesterol, da peroxidação lipídica na forma de malonialdeído (MDA) e das citocinas inflamatórias (IL-1β, TNF-α e IL-10). Além disso, foram coletadas as aortas de ambos os grupos para a avaliação “en face” da deposição lipídica. Ainda foi realizada a coleta de amostras do SFO e do RVLM dos dois grupos para a realização da dosagem de espécies reativas de oxigênio pela técnica do di-hidroetídio (DHE) e para a quantificação de citocinas inflamatórias (IL-1β, TNF-α e IL-10) no SFO. Observamos um aumento significativo dos níveis de colesterol total nos animais apoE-/- em relação aos animais controle (237,4±17,7 mg/dL n=6 vs 90,7±6,4 mg/dL n=6, p<0,05), ambos alimentados com dieta padrão e com idade de 13 meses. Observamos também uma maior deposição lipídica nos animais apoE-/- quando comparados com os controles (27,7±4,8% n=3 vs 5,3± 0,6% n=4, p<0,05, respectivamente). Houve aumento nos níveis séricos de malondialdeído nos camundongos apoE-/- quando comparados com o controle (1,8±0,2 nmol/mL, n=15 vs 1,1±0,2 nmol/mL, n=12, p<0,05). Com relação a avaliação inflamatória sistêmica, observamos aumento nos níveis de IL-1β nos animais apoE-/- quando comparados aos controles (17,7±2,9 pg/mL, n=11 vs 5,8±0,5 pg/mL, n=11, p<0,05), bem como o TNF-α que também se apresentou elevado nos animais ateroscleróticos (4,6±0,8 pg/mL, n=8 vs 2,1±0,6 pg/mL, n=8, p<0,05). No entanto, não constatamos diferença significativa nos níveis de IL-10 quando comparamos ambos os grupos (apoE-/-:201,6±16,0 pg/mL, n=6 vs C57BL/6:190,1±11,1 pg/mL, n=6). Quanto à avaliação do estresse oxidativo no SFO e no RVLM foi observado aumento nos níveis de O2•- em ambas as áreas dos camundongos apoE-/- quando comparados com o controle (SFO: 36,4±2,1 FR/u.a, n=4 vs 19,4±2,1 FR/u.a, n=4, p<0,05; RVLM: 31,7±2,7 FR/u.a, n=4 vs 16,0±1,0 FR/u.a, n=5, p<0,05). Por fim avaliamos os níveis de citocinas inflamatórias no SFO e observamos uma diminuição nos níveis tanto das citocinas pró-inflamatórias (TNF-α como da IL-1β), como da IL-10 (anti-inflamatória) nos camundongos apoE-/- quando comparados com o controle: IL-1β (4,4±0,3 pg/mL n=5, vs 9,1±0,8 pg/mL n=5, p<0,05), TNF-α (3,0±0,7pg/mL, n=7 vs 6,4±0,9 pg/mL n=7, p<0,05), IL-10 (214,0±1,9 pg/mL n=3, vs 354,2±19,3 pg/mL n=3, p<0,05). Portanto, concluímos que os animas apoE-/- alimentados com dieta padrão apresentam níveis elevados de EROs no SFO e RVLM, que em conjunto, são importantes regiões responsáveis pelo controle cardiovascular. Podemos ainda sugerir que, possivelmente, as citocinas inflamatórias periféricas participam da indução do estresse oxidativo central a partir da sua ação no SFO.
Abstract: Atherosclerosis is a multifactorial disease, considered as one of the main risk factors that lead to the development of cardiovascular diseases. It is characterized by endothelial and autonomic dysfunction due to the presence of inflammation and systemic oxidative stress. The objective of this study was to evaluate the presence of ROS (reactive oxygen species) in the subfornical organ (SFO) and rostral ventrolateral medulla (RVLM) of animals knockout apolipoprotein E (apoE-/-) fed with a standard diet and the possible relation of the presence of peripheral inflammatory cytokines with central oxidative stress. So, for this purpose, the serum was collected from C57BL/6 mice, isogenic mice, and apoE-/-, mice, also isogenic, genetically modified for the deletion of the gene coding for apolipoprotein E. The serum was used for cholesterol dosage, lipid peroxidation in the form of malonialdehyde (MDA) and inflammatory cytokines (IL-1β, TNF-α and IL-10). In addition, the aortas of both groups were collected for the evaluation of lipid deposition. For the determination of reactive oxygen species by the dihydroethidine technique (DHE) and quantification of inflammatory cytokines (IL-1β, TNF-α and IL-10) were also collected samples from the SFO and RVLM from the two groups. We observed a significant increase in total cholesterol levels in apoE-/- animals compared to control animals (237.4±17.7 mg/dL n=6 vs 90.7±6.4 mg/dL n=6, p<0.05), both fed a standard diet. We also observed a higher lipid deposition in the apoE-/- animals when compared to controls (27.7±4.8% n=3 vs 5.3±0.6% n=4, p<0.05, respectively). There was an increase in serum levels of malonialdehyde in the apoE-/- mice compared to the control (1.8±0.2 nmol/mL, n=15 vs 1.1±0.2 nmol/mL, n=12, p<0.05). Regarding systemic inflammatory evaluation, we observed an increase in IL-1β levels in apoE-/- animals when compared to controls (17.7±2.9 pg/mL, n=11 vs 5.8±0.5 pg/ML, n=11, p<0.05), as well as TNF-α, which was also elevated in atherosclerotic animals (4.6±0.8 pg/mL, n=8 vs 2.1±0.6 pg/mL, n=8, p<0.05). However, we did not observe a significant difference in IL-10 levels when we compared the groups (apoE-/-: 201.6±16.0 pg/mL, n=6 vs C57BL/6: 190.1±11.1pg/mL, n=6). Regarding the evaluation of the oxidative stress in SFO and RVLM, an increase in O2•- levels was observed in both areas from the apoE-/- animals compared to the control (SFO: 36.4±2.1FR/u.a, n=4 vs 19.4±2 FR/u.a, 1, n=4, p<0.05; RVLM: 31.7±2.7 FR/u.a, n=4 vs 16.0±1.0 FR/u.a, n=5, p<0.05). Finally, we evaluated the levels of inflammatory cytokines in the SFO, and observed a decrease in the levels of both the proinflammatory cytokines (TNF-α and IL-1β) and IL-10 (anti-inflammatory) in apoE-/-: IL-1β (4.4±0.3 pg/mL n = 5, vs. 9.1 ± 0.8 pg/mL n=5, p<0.05), TNF-α (3.0±0.7 pg/mL, n=7 vs 6.4±0.9 pg/mL n=7, p<0.05), IL-10 (214.0±1.9 pg/mL n=3, vs 354.2±19.3 pg/mL n=3, p<0.05). Therefore, we can conclude that apoE-/- animals fed standard diet have high levels of ROS in the SFO and RVLM, which together are important regions responsible for cardiovascular control. We may also suggest that the peripheral inflammatory cytokines participate in the induction of central oxidative stress from its action in the SFO.
Palavras-chave: Estresse oxidativo
Aterosclerose
Citocinas inflamatórias
Oxidative stress
Atherosclerosis
Inflammatory cytokines
CNPq: CIENCIAS BIOLOGICAS::FISIOLOGIA
Idioma: por
País: Brasil
Editor: Universidade Federal da Paraíba
Sigla da Instituição: UFPB
Departamento: Ciências Fisiológicas
Programa: Programa Multicêntrico de Pós-Graduação em Ciências Fisiológicas
Citação: ASSIS, Taísa França de Medeiros. Avaliação do estresse oxidativo no órgão subfornical e no bulbo ventrolateral rostral de animais Knockout para apolipoproteína E. 2017. 92 f. Dissertação (Mestrado em Ciências Fisiológicas) - Universidade Federal da Paraíba, João Pessoa, 2017.
Tipo de Acesso: Acesso aberto
URI: https://repositorio.ufpb.br/jspui/handle/tede/9698
Data do documento: 13-Jun-2017
Aparece nas coleções:Centro de Biotecnologia (CBIOTEC) - Programa Multicêntrico de Pós-graduação em Ciências Fisiológicas

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